禽波氏桿菌PCR試劑盒的操作方法分享
點(diǎn)擊次數(shù)：509 更新時(shí)間：2023-06-06
PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是基于DNA可逆性復(fù)制過程的分子生物學(xué)技術(shù)，該技術(shù)以放大DNA作為檢測(cè)某類特定微生物、基因或設(shè)置一類基因突變的手段而廣泛使用。需要儀器設(shè)備和試劑盒等工具來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。現(xiàn)本文簡(jiǎn)單介紹如何操作
禽波氏桿菌PCR試劑盒。
步驟1：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
在進(jìn)行試驗(yàn)前，請(qǐng)從-20℃保存禽波氏桿菌PCR試劑盒的內(nèi)容物，冰凍在保險(xiǎn)柜中長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月或更久。嚴(yán)格損壞或超期的物品不要使用。將PCR換??nuclease-free水解凍，并遵循此后面指導(dǎo)的操作提示。
步驟2：混和PCR反應(yīng)液
干燥PCR溶液A+B混合物重，加入dH_2O100μL（每個(gè)樣本）。從原始DNA樣本中提取1μL并將其添加到管中。每個(gè)標(biāo)記使用完整盒子中的所有通量級(jí)別以確保溶液替代物可以容納一個(gè)確信區(qū)域。pipette上演沸騰30秒（龍頭混合澄清），離心10秒，并放入熱循環(huán)器中。
步驟3：樣品擴(kuò)增
進(jìn)入熱循環(huán)過程，程序?yàn)椋?5秒95℃→30秒57℃→30秒72℃）×35次和10分鐘72℃。放置PCR產(chǎn)品在冰上。
步驟4：電泳檢測(cè)
從PCR反應(yīng)管的每個(gè)標(biāo)簽中移動(dòng)5μLPCR擴(kuò)增產(chǎn)物，并將其滴到薄板或管中。然后使用1-2％瓊脂糖/TAE凝膠進(jìn)行電泳處理。用溴化乙錠染色，并通過UV燈檢查這些凝膠片。根據(jù)需要確定擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。
總之，在使用禽波氏桿菌PCR試劑盒時(shí)，需要了解其所采用的PCR技術(shù)并仔細(xì)閱讀說明書，并在實(shí)驗(yàn)室條件下非常謹(jǐn)慎地操作。
