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PCR檢測試劑盒注意事項分類你知道有哪些
點擊次數(shù):1674 更新時間:2020-10-21

PCR檢測試劑盒ELISA的原理:

PCR檢測試劑盒bai是抗原du或抗zhi體的固相化及抗原或抗體的酶標dao記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠c-jun ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠膽固醇(CH)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

大鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T

PCR檢測試劑盒注意事項:

1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2. 在PCR檢測試劑盒中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。

(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。 

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